Jeste li ikada htjeli uzgajati bakterije za znanstveni projekt ili samo iz zabave? Iznenađujuće je jednostavno - sve što trebate je agar (poseban želatinozni materijal za uzgoj), niz steriliziranih Petrijevih zdjelica i neki dobri izvori odvratnih bakterija!
korake
1. dio od 3: Priprema Petrijevih zdjelica
Korak 1. Pripremite agar
Agar je želatinozna tvar koja se koristi za uzgoj bakterija. Napravljen je od vrste crvenih algi, koja pruža idealnu površinu za rast mnogih različitih vrsta bakterija. Neke vrste agara sadrže hranjive tvari (poput ovčje krvi) koje potiču snažniji rast bakterija.
- Najlakši tip agara za ovaj eksperiment je agar koji dolazi u obliku praha. Trebat će vam 1,2 g (oko 1/2 žličice) agar praha za svaku Petrijevu zdjelu od 4 inča koju želite upotrijebiti.
- U posudi ili zdjeli otpornoj na toplinu pomiješajte 1/2 žličice agara u prahu u 60 ml (približno 1/4 šalice) vruće vode. Pomnožite ove količine s brojem Petrijevih zdjelica koje namjeravate upotrijebiti.
- Zdjelu ili tanjur stavite u mikrovalnu pećnicu i pirjajte minutu, pazeći da se otopina agara ne prelije.
- Kad je otopina spremna, agar u prahu treba potpuno otopiti, a tekućina biti bistra.
- Ostavite otopinu agara da se ohladi nekoliko minuta prije nego nastavite.
Korak 2. Pripremite Petrijeve posude
Petrijeve posude su male posude s ravnim dnom od prozirnog stakla ili plastike. Imaju dvije polovice - gornju i donju - koje pristaju jedna uz drugu. Time se štiti sadržaj od neželjenog kontaminiranog zraka, ali se također omogućuje istjecanje plinova koje proizvodi bakterija.
- Petrijeve zdjelice moraju se potpuno sterilizirati prije upotrebe za rast bakterija; u protivnom mogu utjecati na rezultate ispitivanja. Novo kupljene Petrijeve posude moraju biti prethodno sterilizirane i zatvorene u plastičnim posudama.
- Izvadite Petrijevu zdjelu iz pakiranja i odvojite dvije polovice. Pažljivo ulijte vruću otopinu agara u donju polovicu Petrijeve zdjele - tek toliko da se formira sloj na dnu posude.
- Brzo postavite gornju polovicu Petrijeve zdjelice kako biste spriječili da bakterije u zraku kontaminiraju eksperiment. Petrijeve posude ostavite sa strane 30 minuta do dva sata, dok se otopina agara ne ohladi i stvrdne (kad bude spremna, nalikovat će želatini).
Korak 3. Petrijeve posude ohladite do upotrebe
Ako ne planirate odmah upotrijebiti Petrijeve posude napunjene agarom, treba ih čuvati u hladnjaku dok ne budete spremni za nastavak pokusa.
- Čuvanje Petrijevih zdjelica u hladnjaku sprječava isparavanje vode u posudama (bakterijama je za rast potreban vlažan okoliš). Također omogućuje da se površina agara lagano stvrdne, čime se sprječava lom ili udubljenje prilikom prijenosa uzoraka bakterija.
- Prilikom čuvanja Petrijevih zdjelica u hladnjaku, treba ih staviti naopako. To pomaže u sprječavanju stvaranja kondenzacije na poklopcu od pada u uzorak i ometanja rastuće površine.
- Petrijeve posude s agarom mogu se čuvati u hladnjaku do dva mjeseca. Kad ste spremni za upotrebu, izvadite ih iz hladnjaka i pustite da dosegnu sobnu temperaturu prije nego što unesete uzorke.
Dio 2 od 3: Uzgoj bakterija
Korak 1. Uvedite bakterije u Petrijeve zdjele
Nakon što se otopina agarja stvrdne i Petrijeve zdjelice budu na sobnoj temperaturi, spremni ste za zabavni dio - uvođenje bakterija. Postoje dvije metode za to - izravnim kontaktom ili prikupljanjem uzoraka.
-
Izravni kontakt:
Tada se bakterije prenose u Petrijevu zdjelu izravnim dodirom, tj. Dodirom agara. Jedan od najčešćih načina za to je jednostavno lagano pritisnuti vrh prsta (prije ili nakon pranja ruku) na površinu agara. No, također možete pokušati pritisnuti nokat ili površinu starog novčića na agar, ili čak staviti malu dlačicu ili kap mlijeka na tanjur. Koristi svoju maštu!
- Zbirka uzoraka: Ovom metodom možete sakupiti bakterije s gotovo bilo koje površine i prenijeti ih u Petrijevu zdjelicu; sve što trebate su čisti pamučni štapići. Samo uzmite pamučni štapić i prođite njime po bilo kojoj površini koje vam padne na pamet - unutrašnjosti usta, kvake na vratima, tipki na tipkovnici vašeg računala ili gumba na daljinskom upravljaču - a zatim izgrebite površinu agara (bez kidanja) to). Ta mjesta sadrže mnogo bakterija i trebala bi u dva dana dati zanimljive (i odvratne) rezultate.
- Ako želite, možete staviti više od jednog uzorka bakterije u svaku Petrijevu zdjelu - sve što trebate učiniti je podijeliti posudu na kvadrante (četvrtine) i u svaki od njih staviti drugačiji uzorak bakterije.
Korak 2. Označite i zapečatite Petrijeve zdjele
Nakon što ste unijeli bakteriju, trebali biste staviti poklopac na Petrijevu zdjelu i zalijepiti je trakom.
- Svaka Petrijeva zdjelica mora biti označena izvorom bakterija koje sadrži; inače nećete moći reći što je koje. To možete učiniti pomoću vrpce i markera.
- Kao dodatnu mjeru opreza, svaku Petrijevu zdjelicu možete staviti u nepropusnu vrećicu. To će pružiti dodatni sloj zaštite od opasnih bakterijskih kolonija koje se mogu razviti, ali će vam i dalje omogućiti pregled sadržaja Petrijeve zdjele.
Korak 3. Petrijeve posude stavite na toplo, tamno mjesto
Ostavite Petrijeve posude na toplom, tamnom mjestu gdje bakterije mogu neometano rasti nekoliko dana. Ne zaboravite pohraniti ploče naopako kako rast bakterija ne bi bio ometen nikakvom kapljicom vode.
- Idealna temperatura za rast bakterija je između 70 i 98 stupnjeva F (20 do 37 stupnjeva C). Ako je potrebno, Petrijeve zdjelice možete staviti na hladnije mjesto, ali će bakterije rasti mnogo sporije.
- Dopustite bakterijama da rastu 4 do 6 dana jer će to omogućiti dovoljno vremena za rast kulture. Kad bakterije počnu rasti, možete primijetiti miris koji dolazi iz ploča.
Korak 4. Zapišite svoje rezultate
Nakon nekoliko dana primijetit ćete nevjerojatnu raznolikost bakterija, plijesni i gljivica koje rastu unutar svake Petrijeve posude.
- Upotrijebite bilježnicu da zabilježite svoja zapažanja o sadržaju svake ploče i možda dođete do zaključka o tome gdje je bilo najviše bakterija.
- Je li to bila unutrašnjost vaših usta? Ručka na vratima? Gumbi na daljinskom upravljaču? Rezultati bi vas mogli iznenaditi!
- Ako želite, možete izmjeriti dnevni rast bakterijskih kolonija, pomoću flomastera ocrtati krug oko svake kolonije na dnu Petrijeve zdjele. Nakon nekoliko dana trebali biste imati skup koncentričnih prstenova na dnu svake posude.
Korak 5. Ispitajte učinkovitost antibakterijskih sredstava
Zanimljiva varijacija ovog pokusa je uvođenje antibakterijskog sredstva (sredstvo za dezinfekciju ruku, sapun itd.) U Petrijevu zdjelu kako bi se provjerila njegova učinkovitost.
- Nakon što ste unijeli bakteriju u Petrijevu zdjelu, pamučnim štapićem stavite malu kap gela za dezinfekciju ruku, dezinfekcijskog sapuna ili izbjeljivača u središte uzorka bakterija, a zatim nastavite eksperiment kao i obično.
- Kako bakterije u plaku rastu, trebali biste vidjeti prsten ili "aureolu" oko mjesta gdje ste stavili antibakterijsko sredstvo za koje ne rastu bakterije. Ovo je poznato kao "zona smrti".
- Učinkovitost različitih antibakterijskih sredstava može se mjeriti usporedbom veličine zona ubijanja u svakoj Petrijevoj zdjelici. Što je veća zona ubijanja, to je antibakterijsko sredstvo učinkovitije.
Dio 3 od 3: Sigurno zbrinjavanje bakterija
Korak 1. Poduzmite odgovarajuće sigurnosne mjere
Prije nego što pokušate baciti svoje Petrijeve zdjele, najprije morate poduzeti odgovarajuće sigurnosne mjere.
- Iako većina bakterija koje uzgajate nisu opasne, velike bakterijske kolonije mogu predstavljati veći rizik - pa ćete ih morati ubiti prije odlaganja izbjeljivačem.
- Zaštitite ruke od izbjeljivača nošenjem gumenih rukavica, zaštitite oči plastičnim naočalama, a odjeću zaštitite pregačom.
Korak 2. Ulijte izbjeljivač u Petrijeve posude
Otvorite Petrijevu zdjelicu i pažljivo sipajte malu količinu izbjeljivača na kolonije bakterija držeći zdjelu iznad sudopera. To će uništiti bakterije.
- Budite vrlo oprezni kako izbjeljivač ne bi dotaknuo vašu kožu jer može opeći.
- Zatim dezinficiranu Petrijevu posudu vratite u nepropusnu plastičnu vrećicu i odložite vrećicu u smeće.